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用福林-吴宪氏法测定血糖时,如果测定管颜色明显深于或浅于标准管颜色...
1、试剂的颜色由深褐色慢慢变为浅黄色,直到状态变为过水。此时会有实时的电解曲线,显示屏开始计数。此时取出进样器,等待仪器自动调整平衡。仪器状态显示正常,并报警达到平衡状态。
2、比如24小时尿蛋白总量,比如尿蛋白肌酐比值测定,比如尿蛋白电泳检查,比如尿微量白蛋白检查。 正常情况下,24小时尿蛋白总量30mg/24h,则称为微量白尿蛋白。
3、适用于红细胞脆性试验,血气分析,红细胞压积试验,血沉及普能生化测定,不适于做血凝试验。过量的肝素会引起白细胞的聚集,不能用于白细胞计数。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色,故也不适于白细胞分类。
4、适用于红细胞脆性试验,血气分析,红细胞压积试验,血沉及普能生化测定,不适于做血凝试验。
福林酚法的测定方法出自哪个标准?
1、LoWry法是双缩脲法(Biuret)和福林酚法(Folin-酚)泰国福林试管的结合与发展。其原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后泰国福林试管,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产生双缩脲反应泰国福林试管,形成铜—蛋白质的络合盐。
2、(一)方法:采用分段盐析法提取分离POD;用透析法脱盐;用福林酚法测定蛋白质含量;愈创木酚法测定POD活性,计算比活力和回收率;用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离鉴定POD同工酶。(二)目的要求:掌握实验的基本原理和方法;能设计实验操作流程。
3、考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素络合物在595nm波长下有最大光吸收。
4、蛋白酶的种类繁多,不同的蛋白酶的性质和催化反应条件各不相同,无法规定一个统一的测定方法,目前使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。
5、olin—酚试剂法(Lowry法)这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。
6、福林试剂里面有钨酸钠、钼酸钠、磷酸、浓盐酸、硫酸锂、溴水。
干扰folin的因素有哪些?
1、酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。
2、优点:灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多。缺点:费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰folin-酚反应(Lowry反应)。
3、对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰folin-酚反应(Lowry反应)。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。
4、Folin酚法干扰物质较多,不适于硫柳汞做防腐剂的样品和核酸含量较高的样品检测;蛋白糖化物对考马斯亮蓝法存在干扰,因此,应用考马斯亮蓝法测定含糖基蛋白的制品时需进一步改进。
5、试剂破坏后,还原性的生成物可再次反应,后者的变化于30min可达到最大值。对其评价是,该方法较双缩脲法反应灵敏,与0.1mg/ml浓度的蛋白质样品亦可得到很好的显色反应,使用很广泛,但花费时间长,其干扰因素较多。
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